苏木素伊红混合染色液(一步法)

简介:

苏木素(Hematoxy1in)和伊红(Eosin)联合染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是- -种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核色。在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，i细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。

   Leagene苏木素伊红混合染色液是把苏木素和伊红混合在一起，只需对细胞、组织等样本染色一次，既能使苏木素上色亦可使伊红上色的新型染色液，可用于染色样本的类型有石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、培养细胞以及体液涂片(如宫颈粘液涂片、脑脊液涂片等)等，本产品尤其适用于血液涂片和体液涂片染色。

 

染色原理:

1、 细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。

3、分化作用:

染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用:

分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需:时间较长。

 

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1、盐酸乙醇分化液

2、蓝化液，如稀氨水、碳酸锂溶液等

3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考):

1、切片预处理:取血液涂片或体液涂片置于乙醇固定，用蒸馏水水洗。

2、苏木素伊红混合染色液滴染。

3、水洗。

4、用盐酸乙醇分化，水洗。

5、用碳酸锂水溶液返蓝，水洗。

6、封片，光学显微镜下观察、拍照。

染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质呈红色。

注意事项:

1、 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。

2、盐酸乙醇 分化时间应根据细胞涂片的具体情况而定。

3、蓝化液常使用 0. 2~ 1%氨水或Scott促蓝液或0. 1~ 1%碳酸锂溶液。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性 手套操作。

有效期: 12 个月有效。.

 

 

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