土壤基因组DNA提取试剂盒

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Cas号
M D L
分子式
分子量
产品参数 产品简介:
本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物 DNA。对土壤中各种细菌、真菌
有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多态性。
本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料,可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的
产率,纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、
Southern 杂交等实验。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机
在室温下离心。
1、称取土壤样本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入 450ul 溶液A 震荡混匀。
* 也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管( 建议使用 2ml 圆底管) ,加入 450ul 溶液 A 剧烈震荡混匀
1-2min 至没有固体块。 使用液氮研磨效果最佳。
2 、加入50ul 溶液B 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡),65℃水浴 6min,每2min充分颠倒混匀一次。
3 、加入100ul 溶液C 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡),12000rpm离心10min 。
4 、将上清转移到新的离心管,12000rpm离心2min 。
5 、在吸附柱中加入 200ul 溶液D ,将离心后的上清加入到带有溶液 D 的吸附柱中,用移液器吹吸几次混
匀,12000rpm离心1min。
6 、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须),12000rpm离心1min。
7 、倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm离心1min。
8 、倒掉收集管中的废液,重复步骤 7 两次(共漂洗三次)。
9 、倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm离心2min 。
10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等),或50℃干燥1min。
11 、将吸附柱放入一个新的离心管中,加入 50-100ul 洗脱液(65 ℃预热),12000rpm离心1min。
12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物 DNA 溶液。
13、若产物PCR 效果差,可以适当稀释 DNA产物,或添加1/10 体积的PCR 增强剂。
注意事项:
1 、新鲜的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2 、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。
3 、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4 、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul ,体积过小会影响回收效率;建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液,
用水洗脱也会损失部分产物;DNA应保存在-20 ℃避免反复冻融,以防降解。
5 、若产物含有腐殖质残余则会严重影响 DNA的光吸收值,应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方
式鉴定。
6 、液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即使用大量清水冲洗。
性状 试剂盒内容: 50T 100T
溶液A 25ml 50ml
溶液B 3ml 6ml
溶液C 5ml 10ml
溶液D 10ml 20ml
漂洗液 15ml 15ml×2
洗脱液 10ml 20ml
吸附柱 50个 100个
收集管 50个 100个
PCR增强剂 500ul 1ml
说明书 1份 1份

注:试剂盒开封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。PCR 增强剂-20 ℃保存。
贮存 室温(15℃-25 ℃) 干燥保存,复检期 12 个月,2 ℃-8 ℃保存时间更长。
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