质粒小量提取试剂盒

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M D L
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分子量
产品参数 质粒小量提取试剂盒介绍:

本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的特性提取质粒DNA。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。从1-5ml大肠杆菌LB培养液中,可快速提取5-15μg纯净地高拷贝质粒DNA,提取率达85-90%。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学试验,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂,操作安全。

注意事项:
1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA
全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙
醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。
3、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊,如有混浊现
象,可在37℃水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。
4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即盖紧盖子,如非指明,所
有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心。
5、如果是提取革兰氏阳性菌质粒,必须在裂解细胞前破细胞
壁,方法如下:收集适量菌体,加入250ul溶液Ⅰ,充分悬浮
菌体,加入溶菌酶至终浓度为10-20mg/ml,37℃处理30min
左右。加入溶菌酶的浓度和处理时间可根据不同的菌株和具体
试验条件进行调整。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效
率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液
应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范
围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
性状 试剂盒组成 50 100 储存条件
RNase A 300ul 500ul -20℃
溶液Ⅰ 15ml 30ml RT
溶液Ⅱ 15ml 30ml RT
溶液Ⅲ 20ml 40ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT
洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT
收集管 50个 100个 RT
说明书 1份 1份 RT
贮存
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