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无内毒素质粒小量提取试剂盒

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1308111173-50T 现货 0 ￥462 请登录
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1308111173-100T 现货 0 ￥627 请登录
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别 名
Cas号
M D L
分子式
分子量
产品参数 产品简介：本试剂盒采用可以特异性结合核酸的硅基质膜和碱裂解法提取细菌质粒DNA，从1-5ml大肠杆菌LB培养液中，可快速提取5-15μg纯净地高拷贝质粒DNA。所采用的内毒素清除剂能有效地去除质粒溶液中的内毒素，纯化的质粒内毒素含量小于0.1EU/ug。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学试验，包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。

1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。

2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。

3. 使用前请先检查溶液P2、P3和P4是否出现混浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。

4. 洗脱缓冲液体积不应少于50ul，体积过小影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)， pH值低于7. 0会降低洗脱效率。 DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

5. 质粒DNA浓度＞1mg/ml时清除内毒素效率降低。由于质粒DNA本身的性质，清除过程可导致部分质粒DNA丢失，但内毒素却能得到最大限度清除。

6. 所有溶液应用无内毒素的高纯水配制，所有器械材料均应不含内毒素，玻璃器皿可高温烘烤，非挥发性水溶液可高压处理。

7. DNA浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 得到的DNA可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、 40μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响吸光值，但并不表示纯度低。
性状 试剂盒组成 50T 100T
RNase A 300ul 500ul
内毒素清除剂 20ml 40ml
溶液P1 10ml 20ml
溶液P2 10ml 20ml
溶液P3 10ml 20ml
溶液P4 30ml 60ml
漂洗液 15ml 15ml×2
洗脱液 15ml 30ml
吸附柱 50个 100个
收集管 50个 100个
说明书 1份 1份
贮存
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