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聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒

Cas  号:

 
分子式:  
订货信息:
货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227173414 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 20T 396元 现货 3天
1227173411 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 50T 858元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 试剂盒内容: 20T 50T
溶液A 5ml 15 ml
溶液B 20ml 50 ml
漂洗液 15ml 15ml
洗脱液 1.5ml 1.5ml
研磨杵   20个 50个
过滤柱   20个 50个
吸附柱       20个 50个
说明书 1份 1份
质量标准: 产品简介:
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于后续各种常规操作,包括酶切、PCR 、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

操作步骤:
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇,所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心。
1 .将单一的目的 DNA条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入 1.5ml 离心管中,称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入 2 倍体积的溶液A 吹打混匀(每 100mg 胶加入200ul 溶液A),75℃水浴30分钟。
2 .用1ml 的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入)。13,000rpm 离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
3. 取六倍体积溶液 B 加入原离心管中(每 100mg 胶加入600ul),清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm 离心1 分钟。将所有收集的滤出液混合。
4 .将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入),13,000rpm 离心30-60 秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5 .向吸附柱中加入 600μl 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000rpm 离心30-60 秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6 .向吸附柱中加入 600μl 漂洗液,13,000rpm 离心30-60 秒,倒掉废液。
7 .将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温 1-2 分钟,彻底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8 .将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量 65–70℃预热的洗脱缓冲液 20-30μ l ,室温放置2 分钟。13,000rpm 离心2 分钟收集DNA溶液。注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,13,000rpm 再次离心1 分钟。②洗脱缓冲液体积不应少于 20 μ l ,体积过小影响回收效率。③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 之间。
9 .DNA回收产物直接后续实验或者-20 ℃保存。
注意事项: 
1 .电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2 .切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA造成损伤。
3 . 本试剂盒对<50bp DNA 片段回收效率偏低(30% 左右),如要回收,应加大结合液的体积,延长吸附和洗脱的时间。 
4 .回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。

贮 存: 室温(15 ℃-25℃)  干燥保存,复检期12 个月,2 ℃-8 ℃保存时间更长。
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