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PAGE凝胶银染试剂盒
PAGE gel silver dye kits

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分子式:  
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货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227182312 PAGE凝胶银染试剂盒 1L 1699元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 注:1L规格指可配制的硝酸银染色液的体积,实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。

 产品简介:

核酸银染的原理是银离子可与核酸形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比EB高200倍,该产品整个过程只需要20分钟,操作简单,灵敏度高,能检测到10ng以下的DNA条带。
操作步骤:

质量标准: 一、染色液配制
需要配制的染色液体积根据PAGE胶的大小而定,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。配制用的器皿清洗干净后用去离子水涮洗,染色液须用去离子水配制,现用现配。如果配制的溶液体积不是100mL,可以按比例改变各成分用量。
1,硝酸银染液:称取0.2g硝酸银,加入到90ml去离子水中彻底溶解,加入10ml溶液A混匀,现用现配。
2,显色液:分别取溶液B和溶液C 各10ml加入80ml去离子水中混匀,现用现配。
3,终止液:取终止液D 10ml加去离子水稀释至100ml,现用现配。
二、染色:
1,PAGE电泳结束后,将PAGE蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中,用去离子水漂洗两遍,每次2min。
2,将PAGE胶转移至硝酸银染液中,使染液没过PAGE胶,室温染色10min。可置于摇床上缓慢摇晃,使其染色均匀。
3,弃去染色液,用去离子水快速漂洗三次,每次半分钟。
4,将PAGE胶转移至显色液中,使显色液没过PAGE胶,室温摇晃显色至条带清晰可见。
5,可选,将PAGE胶转移至终止液中,终止显色1min。
6,银染后PAGE胶可拍照保存或用于后续试验。
注意事项:
1.银染主要出现在PAGE胶的表面,使用薄胶(0.5-0.75mm)可以提高灵敏度。
2.对于考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE胶,可用甲醇将胶漂洗后,继续进行银染。考染过程中的乙酸会干扰银染,因此要确保将PAGE凝胶中残留的乙酸彻底洗净。
3.不同蛋白质对银染的反应是不一样的,尤其是碱性蛋白染色效果差。因此,不宜用银染测定不同蛋白的比例。
4.染色过程中,缓慢的振荡是必要的,一般选择40-60 rpm.
5.凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致,所以全程中都应带手套操作。
6.PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的,所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。
7.如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面,可能是在几步漂洗过程中洗得不够彻底,或是染色过程时温度太低。
8.较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。
9.PAGE胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100和两性电解质这些物质会干扰银染。
10.室温操作时,温度的波动往往会干扰银染的效果,恒温水浴可以解决这个问题。
11.凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高40倍。
12.染色使用的玻璃器皿必须非常干净,用酸浸泡可以满足要求。
13.银染应尽快照相,随着时间延长,蛋白条带会变浅,而背景会加深。
14.银染容器最理想的是玻璃平皿,其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。
贮 存: 室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月。
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