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PAGE凝胶银染试剂盒
英文名:PAGE gel silver dye kits
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货号 | 规格 | 货期 | 库存 | 价格 | 会员价 | 订购 |
13081167721 | 1L | 现货 | 0 | ¥1699 | 请登录 |
别 名 | |
Cas号 | |
M D L | |
分子式 | |
分子量 | |
产品参数 | 一、染色液配制
需要配制的染色液体积根据PAGE胶的大小而定,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。配制用的器皿清洗干净后用去离子水涮洗,染色液须用去离子水配制,现用现配。如果配制的溶液体积不是100mL,可以按比例改变各成分用量。 1,硝酸银染液:称取0.2g硝酸银,加入到90ml去离子水中彻底溶解,加入10ml溶液A混匀,现用现配。 2,显色液:分别取溶液B和溶液C 各10ml加入80ml去离子水中混匀,现用现配。 3,终止液:取终止液D 10ml加去离子水稀释至100ml,现用现配。 二、染色: 1,PAGE电泳结束后,将PAGE蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中,用去离子水漂洗两遍,每次2min。 2,将PAGE胶转移至硝酸银染液中,使染液没过PAGE胶,室温染色10min。可置于摇床上缓慢摇晃,使其染色均匀。 3,弃去染色液,用去离子水快速漂洗三次,每次半分钟。 4,将PAGE胶转移至显色液中,使显色液没过PAGE胶,室温摇晃显色至条带清晰可见。 5,可选,将PAGE胶转移至终止液中,终止显色1min。 6,银染后PAGE胶可拍照保存或用于后续试验。 注意事项: 1.银染主要出现在PAGE胶的表面,使用薄胶(0.5-0.75mm)可以提高灵敏度。 2.对于考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE胶,可用甲醇将胶漂洗后,继续进行银染。考染过程中的乙酸会干扰银染,因此要确保将PAGE凝胶中残留的乙酸彻底洗净。 3.不同蛋白质对银染的反应是不一样的,尤其是碱性蛋白染色效果差。因此,不宜用银染测定不同蛋白的比例。 4.染色过程中,缓慢的振荡是必要的,一般选择40-60 rpm. 5.凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致,所以全程中都应带手套操作。 6.PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的,所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。 7.如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面,可能是在几步漂洗过程中洗得不够彻底,或是染色过程时温度太低。 8.较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。 9.PAGE胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100和两性电解质这些物质会干扰银染。 10.室温操作时,温度的波动往往会干扰银染的效果,恒温水浴可以解决这个问题。 11.凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高40倍。 12.染色使用的玻璃器皿必须非常干净,用酸浸泡可以满足要求。 13.银染应尽快照相,随着时间延长,蛋白条带会变浅,而背景会加深。 14.银染容器最理想的是玻璃平皿,其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。 |
性状 | 注:1L规格指可配制的硝酸银染色液的体积,实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。
产品简介: 核酸银染的原理是银离子可与核酸形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比EB高200倍,该产品整个过程只需要20分钟,操作简单,灵敏度高,能检测到10ng以下的DNA条带。 操作步骤: |
贮存 | 室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月。 |