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蛋白快速银染试剂盒

英文名：Protein quick silver dye kits
Cas号：
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13081179541 20T 现货 0 ￥1999 请登录
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别 名 蛋白银染试剂盒
Cas号
M D L
分子式
分子量
产品参数 自备材料：
1、 水平摇床或侧摆摇床
2、 去离子水(超纯)
3、 乙醇、冰乙酸
操作步骤(仅供参考) ：
1、 准备工作：以下操作以8.5×5.5cm、厚度为1.0mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，一般用量是25ml，对于凝胶体积较大的，各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程应在摇床上进行，摇床转速控制在60～70rpm。提前配制固定液，即按无水乙醇:冰乙酸:去离子水=5:1:4的比例配制。提前配制洗涤液，即按无水乙醇:去离子水=1:4的比例配制。
2、 水洗：电泳结束后，取凝胶放入去离子水中清洗 2 次，每次 5min。
3、 固定：取凝胶放入 50～100ml 固定液中，在摇床上室温摇动 15～20min，重复固定步骤 1 次。
4、 洗脱：取凝胶放入洗涤液中清洗 2 次，每次 5min。
5、 水洗：去离子水清洗凝胶 2 次，每次 5min。
6、 增敏：配制银染增敏工作液，即取 Silver Stain Sensitizer (500×) 0.1ml 加入到 50ml 去离子水中，混匀，即 1×Silver Stain Sensitizer，一般应 2h 内用完。室温下用 1×Silver Stain Sensitizer 孵育凝胶 2min，立即用去离子水清洗凝胶 2 次，每次 1min。
7、 银染： 配制银染工作液， 即取Silver Stain(100×)0.5ml加入到50ml去离子水中， 混匀， 即得1×SilverStain，一般应 2h 内用完。取凝胶入 1×Silver Stain，在摇床上室温摇动 10～20min。
8、 水洗：弃液，在摇床上用去离子水清洗凝胶 2 次，每次 30s，摇动速度在 60～70rpm。总的水洗时间应控制在 1.5min 内。
9、 显影：配制银染显影工作液，即取 Silver Stain Developer(5×)10ml 加入到 40ml 去离子水中，混匀，即 1×Silver Stain Developer，一般应 30min 内用完。清洗凝胶后，立即置于 1×Silver StainDeveloper 中， 室温孵育 2～10min， 直至蛋白条带清晰可见。 一般显色 30s 后就会出现棕色沉淀，继续显影 2～3min，亦可延长至 5min 以上，如果显影效果不佳，可重新更换 1×Silver StainDeveloper 继续显影。
10、 迅速用去离子水清洗凝胶以避免显影过度，背景染色。立即加入银染终止液，摇床上摇动10min，以终止显色反应。(配制银染终止液，即取 Silver Stain Stop Buffer(10×)10ml 加入到 40ml去离子水中，混匀，即 1×Silver Stain Stop Buffer，一般应 24h 内用完。)
11、 保存：弃终止液，加入去离子水 50ml，摇床上摇动 2～5min，弃液。短期保存于新鲜去离子水，长期保存可以制备干胶。
注意事项 ：
1、背景过深：①显色时间过长；②洗涤不充分；③凝胶中残留物质未去除干净；④去离子水的纯度过低。
2、蛋白条带较浅：①蛋白的半胱氨酸含量过低；②银染后水洗时间过长；③蛋白量较低；④固定后的洗涤时间不够，导致乙酸残留。
3、凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹：①凝胶没有被充分浸没，应加入足量溶液；②容器没有清洗干净；③凝胶接触金属物质；④指纹或其他压迹。
4、本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
性状 产品说明 ：
蛋白快速银染试剂盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一种快速的可用于 SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白银染染色的试剂盒，该试剂盒含有增敏步骤，可明显降低背景。其优点还在于：

1、操作简单、快速；

2、可用于 2D 凝胶的银染，并可进行后续的质谱检测；

3、目的条带清晰；

4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit 与 Protein Silver Stain Kit 相比，前者操作速度更快，当检测灵敏度可能低于后者，尤其是在检测小分子量蛋白质的时候。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
贮存 RT，6个月有效
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