Lowry法蛋白浓度测定试剂盒

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1308111373-1000微孔(100T) 现货 0 ¥462 请登录
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产品参数 产品简介:

Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

操作说明:

1.根据需要量,取适量Folin酚甲试剂A和B按50:1混合,混合后有效期为24小时,过期失效。

2.根据需要量,取适量BSA标准品用PBS稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。

若采用酶标仪法(96孔)

3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS补足到20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),加20ul到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200ul,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

6.各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法(接上述步骤2)

3.取八支(或者更多)5ml离心管,标号,按下表加入试剂。

4.混匀,37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。
性状 产品组成:
Folin酚甲试剂A 100ml×2
Folin酚甲试剂B 5ml
Folin酚乙试剂(1N) 20ml
PBS稀释液 30ml
BSA蛋白标准品(5mg/ml ) 1ml
贮存 BSA蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月,-20℃保存有效期至少一年,其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。
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