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BCA蛋白浓度测定试剂盒

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货号 品名 规格 包装 单价 货期 库存
1227173909 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500微孔(50T) 445.5元 现货 3天
提示信息:偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
性 状: 包装(500微孔) 保存
BCA试剂 100ml 室温
Cu试剂 3ml 室温
PBS稀释液 30ml 室温
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA) 1ml -20℃
质量标准: 产品简介:

     碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明:

一 . 微孔酶标仪法

     1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。

     2. 稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

     3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

     4. 各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二 . 分光光度计法

     如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

注意事项:

    1. 长期不用时,Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。

  2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒

  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

贮 存: 本试剂盒自订购之日起一年内有效。
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